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细胞衰老时，细胞内的衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence-asso***tedβ-galactosidase,sa-β-gal）的活性上调。本试剂盒以x-gal为底物，在衰老相关β-半乳糖苷酶的催化作用下形成蓝色产物，从而在光学显微镜下***察到变成蓝色的衰老细胞。本试剂盒可以用于培养细胞和组织切片的衰老检测。
染色步骤：
（一）冰冻切片
1、冰冻切片，滴加4%***（pfa），室温固定5分钟；
2、纯水洗涤3次，每次5分钟；
3、疏水笔画圈（稍大点）；
4、纯水洗涤3次，每次1分种；
5、滴加sa-beta-gal染色液(100ul/圈)；
6、37?c染色过液2-24小时，镜下观察。
7、染色结束后，纯水洗涤3次，每次2分钟；
8、核固红复染细胞核（选做）；
9、水性封片剂封片。
（二）细胞样本
1、培养细胞去除培养液后，pbs洗2次，4%pfa室温固定5分钟；
2、pbs洗3次，pfa尽量去除干净；
3、加sa-beta-gal染色液（1.5-2ml/35mmdish)；
4、37?c染色2-24小时，镜下观察；
5、染色结束后，pbs洗涤3次；
6、培养皿中留少许pbs，镜下拍照。
注意事项：
1、染色液应现配现用。
2、染色12小时后，如无蓝色的阳性着色，可延长染色时间至24小时。
3、组织样品后固定效果较好。即***行oct速冻包埋，切片后再用4%pfa进行固定。
4、衰老相关β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的ph值，不能用于细胞培养的co2培养箱中进行染色反应。因为co2培养箱中较高浓度的co2会影响染色工作液的ph值，导致染色失败。
5、本试剂盒适合各种类型和规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿和各种孔数的细胞培养板，只需按照一定的比例调整工作液用量即可。
6、需自备pbs或hbss(hanksbalancedsaltsolution)
更多：β-半乳糖苷酶报告***试剂盒
http://www.bi-gene.com/products-36080363.html
https://www.chem17.com/st431186/product_36080363.html
衰老相关β-半乳糖苷酶染色试剂盒